028381 甘露醇卵黃多粘菌素瓊脂平板(MYP)

　　(Mannitol Yolk Polymyxin Agar plate)

　　用 途：

　　甘露醇卵黃多粘菌素瓊脂平板用于蠟樣芽孢桿菌的菌數測定及分離培養(GB/T4789.28-2003中4.64，GB/T4789.14-2003，SN0176-92和SN/T2206.2-2009，ISO標準)。

　　原 理：

　　蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、維生素和生長因子;D—甘露醇為可發酵糖類;氯化鈉維持均衡的滲透壓;瓊脂是培養基的凝固劑;酚紅為pH指示劑;卵黃含有卵磷脂，蠟樣芽孢桿菌產生卵磷脂酶，在菌落周圍產生沉淀環;并發酵D—甘露醇產酸使菌落顯黃色;多粘菌素B可抑制雜菌的生長。

　　培養基配方(每升)：

　　蛋白胨 10g

　　牛肉膏粉 1g

　　D—甘露醇 10g

　　氯化鈉 10g

　　瓊脂 15g

　　酚紅 0.025g

　　最終pH7.4±0.2

　　使用方法： (平板計數法)

　　1、樣品的制備。

　　以無菌操作將檢樣25g(mL)用滅菌生理鹽水或磷酸鹽緩沖液做成10-1—10-5的稀釋液。

　　2、取各稀釋液0.1mL接種到MYP瓊脂平板上，用滅菌L形玻璃棒均勻涂布于整個瓊脂表面。每稀釋度接種兩個MYP瓊脂平板。

　　3、將平板置于36±1℃培養12-20h。

　　4、選取適當菌落的平板進行計數。并計算同一稀釋度兩個平板的平均菌落數。

　　蠟樣芽孢桿菌在MYP平板上生成的菌落為粉紅色，環繞產生卵磷脂酶沉淀環。如反應不典型，可繼續培養24h再計數。

　　5、計數后從每個平板上選取5個已計數的菌落，按有關操作進行證實實驗。

　　6、根據證實實驗確定為蠟樣芽孢桿菌的菌落數，按比例計算出該皿內的蠟樣芽孢桿菌菌落數，然后乘其稀釋倍數，即得每克(或mL)樣品所含蠟樣芽孢桿菌數。例如MYP平板的可疑菌落為25個，取5個鑒定，證實為4個，乘上稀釋倍數(如10-4)，再乘上1 g(或mL)檢樣數(取的是0.1mL樣)則為：

　　25×4/5×10-4×10=2×106

　　質量控制：

　　質控菌株接種后于36±1℃培養24h，結果如下。

　　貯 存：貯存于4-8℃。貯存期三個月。

　　規 格：20個/盒

　　參考文獻:

　　1. GB/T 4789.14-2003 中華人民共和國國家標準 食品衛生微生物學檢驗 蠟樣芽孢桿菌

　　2. GB/T 4789.28-2003 中華人民共和國國家標準 食品衛生微生物學檢驗 染色法,培養基和試劑

　　3. SN 0176-92 中華人民共和國進出口商品檢驗行業標準 出口食品中蠟樣芽孢桿菌檢驗方法

　　4. SN/T2206.2-2009 中華人民共和國出入境檢驗檢疫行業標準 化妝品微生物檢驗方法 第2部分：需氧芽孢桿菌和蠟樣芽孢桿菌

　　5. ISO7932：2004 Microbiology of food and animal feeding stuffs-----Horizontal method for the enumeration of presumptive Bacillus cereus-----Colony-count technique at 30℃